北京协和医院-奥林巴斯显微镜下的精子（组图）

一、操作程序简述

1湿法分析包括下列内容：①浊度，②凝集；②精子计数及其活动力评估o

2．活动摆子百分率及其动力学测定①主观方法；②客观方法。奥林巴斯显微镜

3．稿子计数①血细胞计数器；②Msrkler计数池；③计算机辅助的精液分析（con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA）。

4．制备精液读片桔液涂片、精液染色、形态学分析。

在确定精子数量和活动力过程中，无论采用何种技术，对每一个精液样品均需用湿法或“湿操作”．此法将使检验人员对稿于计致、活动情况和有关动力学具有一个初步的主观印象，并可测定浊度和强度；在测定稿子计数及其活动力过程中，温度显得很重要。显然，37°是*选择；然而，如缺乏调节温度的显微镜操作台，整个分析过程要在此条件下完成是不可能的。通常．精液分析在室温中进行。正如人们所知．室温变化范围很大，因此，必须尽量控制操作区域的温度。

（一）方法

精液*液化后，充分混匀，加一滴未稀释桔液于干净玻片上，盖上盖玻片。也可用自动加样器吸lo微升精浓加至载玻上以提高测定的可重复性。在放大200—400倍（高倍镜）的情况下观察20个视野，评价活动稻子的百分率、相对运动速度和方向以及每一高倍视野下的精于数，评价其浊度和是否有凝块，确定“圆形细胞”（未成熟微生物细胞和白细胞）的百分率。奥林巴斯生物显微镜

（二）浊度

显然，成熟馆子在精掖中占多数。但有时也会发现其他细胞或碎片。来自男性生殖道的亡皮细胞也会存在于精液中。在高倍镜下，偶尔发现上皮细胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出现大量上皮细胞；有时亦可见阴道源性的上皮细胞，这种情况表明俏液样品是经性交中断法收集的．此类细胞应在报告单上注明。北京奥林巴斯显微镜

不成熟的病原茵细胞和白细胞也常在精液中出现，在染色破片上难以区别，而应用湿法操作法则更不可能。通常用巴氏（Papnicolaou，PAP）染色来观察这种“圆形细胞“（大于或等于成熟稻子的10％）；而湿法分析有助于确定哪些样本需用这一方法进一步制备。应对白细胞的确切数目和不成熟病原茵的百分串加以确定和记录（详见后述）。

在精液中，还可能出现其他颗粒性物质如梢肤结晶、滑石粉和杀桔剂颗粒，如发现量很大，则应加以记录。粗大茵体、毛滴虫、念珠菌更应加以报告。

（三）凝集

徕卡显微镜在某些（非全部）含抗精子抗体的桔液样本中，精于可能发生自发性凝集，应在主观判断的基础上加以报告并记录凝集类型和程度，凝集程度的评价用0-Ⅳ表示（表44）。精子凝集方式注明为：头—头、头—尾、尾—尾或混合型。有时出现格子粘附于碎片或其他颗粒性物质的现象，应与真性凝集区别开来。这种现象除非根严重，否则一般不作报告。出现精于凝集提示应作特异性抗精子抗体的检测（见有关章节）。

（四）评估精于数、活动率及其动力学

在精液分析报告中应记录棺子数，避免出现少数、几个、很多、大量馆子等主观性估计。但是，如果每高倍视野观察到大量精子而实际计数所反映数量有所下降，应该怀疑结果的难确性，并重新化验；徕卡显微镜此外，还应对精子活动串（25％、50％、75％或大于80％）和动力学特征（缓樱随意运动和快速直线运动）作出主观评价，并与以客观方法测定的结果相比较。显然这种方法的主观性很强，在测定者之间甚至同一测定者身上易产生差异。然而，这些“主观的粗略分析”常会提示客观分析方法的潜在错误。